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ELISA試劑盒的測(cè)定結(jié)果和標(biāo)準(zhǔn)相差太大怎么辦?

更新時(shí)間:2019-05-28      點(diǎn)擊次數(shù):5855
      ELISA試劑盒測(cè)定值與文獻(xiàn)中相差太大怎么辦,下面看看我們來(lái)仔細(xì)說(shuō)說(shuō):
 ?。?)生化測(cè)定主要目的是比較處理內(nèi)和處理間該指標(biāo)的變化。同時(shí),要測(cè)定值,往往是很可能甚至不可能的。因此,追求的不是值而是相對(duì)值。
 ?。?)用不同測(cè)定方法和不同測(cè)定條件下得到的測(cè)定值可能存在很大差異。因此,如果測(cè)定方法不同,同一樣品的測(cè)定值通常是不可以直接比較的。這也是建議使用試劑盒測(cè)定的理由之一。因?yàn)椴煌髡哂猛辉噭┖袦y(cè)定的數(shù)據(jù)才是可以相互比較的。
 ?。?)同一種材料,不同處理、不同發(fā)育狀態(tài)和不同器官其生化指標(biāo)可能發(fā)生很大變化。因此,能夠直接用來(lái)比較的文獻(xiàn)資料本來(lái)就不多。
 ?。?)當(dāng)然,話說(shuō)回來(lái),測(cè)定值如果與文獻(xiàn)報(bào)道相差太大,首先應(yīng)該檢查單位是否一致,包括摩爾還是毫摩爾,是干重、鮮重還是蛋白質(zhì)濃度,是分鐘還是秒,等等。其次,檢查計(jì)算是否有誤?較后,如果相差不是數(shù)量級(jí),通常是很正常的。
  ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)結(jié)果的處理也是尤為重要的,今日,下面為大家分享ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)結(jié)果的小建議:
  1.ELISA實(shí)驗(yàn)中樣品都要做復(fù)孔或三孔,然后計(jì)算每個(gè)濃度標(biāo)準(zhǔn)品的平均OD值,復(fù)孔的變異系數(shù)應(yīng)該小于20%。
  2.平均OD值減去空白孔的OD值。
  3.制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。以減去本底后的OD值為X軸,標(biāo)準(zhǔn)品的濃度為Y軸,利用作圖軟件得出一個(gè)合適的計(jì)算方法。建議使用合適的軟件來(lái)作圖,比如CurveExpert 1.4。這款軟件能夠給出很多種方法(比如直線、半對(duì)數(shù)、對(duì)數(shù)、四參數(shù)方程等)并從中選擇一條較合適的方程。要想檢驗(yàn)?zāi)硹l曲線是否與表中數(shù)據(jù)吻合,可以將標(biāo)準(zhǔn)品的濃度作為未知數(shù),將對(duì)應(yīng)的OD值帶入該方程,計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)品的濃度,得到的結(jié)果應(yīng)該與實(shí)際濃度很接近(+/-10%)。選擇擬合度較高的那條曲線。
 

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